丙二醛(MDA)检测试剂盒（微量法）

货号：02.10393-100

规格：100 T

保存：-20 ℃保存，一年有效。试剂一低温时会凝固，在使用时可37 ℃震荡溶解。配制好的工作液可4 ℃避光存放至少一个月。

产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系亿奥邦工作人员。

产品简介：

本公司所生产的脂质氧化(MDA)检测试剂盒(Lipid Peroxidation MDA Assay Kit)采用一种基于MDA和硫代巴比妥酸(Thiobarbituric acid, TBA)反应产生红色产物的显色反应，随后通过比色法用于对血浆、血清、尿液、动植物组织或细胞裂解液中MDA进行定量检测，广泛用于脂质氧化(lipid peroxidation)水平检测的试剂盒。

丙二醛(Malondialdehyde，MDA)是一种生物体脂质氧化的天然产物。动物或植物细胞发生氧化应激(oxidative stress)时，会发生脂质氧化。一些脂肪酸氧化后逐渐分解为一系列复杂的化合物，其中包括MDA。此时通过检测MDA的水平即可检测脂质氧化的水平，因此MDA的测定被广泛用作脂质氧化的指标。生物体内的一些其它生化反应也会产生MDA，例如Thromboxane synthase也可以催化产生，但只要在测定时设置适当对照即可观察到脂质氧化水平的变化。丙二醛在较高温度及酸性环境中可与TBA发生反应，形成红色的MDA-TBA加合物，相应的反应原理图如下：

特点：本试剂盒中采用了特殊的抗氧化剂，可以有效地抑制样品在检测过程中产生新MDA，使检测更加准确。同时本检测试剂盒在检测过程中可以把部分MDA天然形成的聚丙二醛分解成MDA，使对脂质氧化的测定更加准确。

测定步骤（仅供参考）：

1. 酶标仪预热30 min以上，调节波长至540 nm。

2. 标准品的稀释：取适量标准品用蒸馏水稀释至100、80、60、40、20、10 nM，用于后续制作标准曲线。

3. 标准曲线的制备：MDA加样：在1.5 mL EP管内加入20 μL 试剂一，150 μL试剂二，150 μL TBA显色液，70 μL蒸馏水最后加入10 μL上述不同浓度标准品用于制作标准曲线。

4. 上述溶液混匀后，95 ºC水浴加热40分钟。加热时务必注意避免液体暴沸溅出。

5. 加热后水浴冷却至室温，室温离心10分钟。取200 μL上清液加入到96孔板中，随后用酶标仪在540 nm处测定吸光度。

注意事项：

1. 上述低温试剂避免反复冻融，以免失效或效率下降。

2. 若开始进行分析，需连续操作至实验完成，不可中途停止。

3. 参考取样量：血清、血浆、尿液取100 μL；低密度脂蛋白悬液取100～200 μL；食用油取30 μL；肝脏、心肌、肌肉等，取5%或10%匀浆100～200 μL。

4. 测定样品吸光度值较低时，可将水浴延长至90 min，但应同时延长，以免造成批间差异。

5. 待测样本如不能及时测定，应置于-20℃保存，4天内稳定。

6. 避免使用EDTA、枸橼酸、氟化钠、草酸等抗凝剂。

7. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

附录（仅供参考）：参考标准曲线范围：MDA 标准品在10、20、40、60、80、100 nM 时的吸光度，作出其标曲如下：

图 1 参考标准曲            图 2 实验现象图片

注意：由于检测仪器和操作手法等条件的不同，参考值范围会有波动，该值仅供参考，对于要求精确计算MDA含量的，可以进行多点测定。