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BCA蛋白浓度测定试剂盒 02.12266

货号:02.12266品牌:EallBio基本售价:320.00元

储存条件:2-8℃保存,有效期1年,附件-20℃保存。

 

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02.12266-500 EallBio 500T 320.00元

 

BCA蛋白浓度测定试剂

货号:02.12266-500

规格:500 T

保存:2-8 ℃保存,有效期12月,附件-20 ℃保存。

产品组成使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系亿奥邦工作人员。

产品组成

包装(500微孔)

保存

试剂A

100 mL

2-8 ℃

试剂B

3 mL

2-8 ℃

PBS稀释液

30 mL

2-8 ℃

BSA蛋白标准(5 mg/mL

1.0 mL

-20 ℃

说明书

1

产品简介:

BCA法是目前应用十分广泛的蛋白定量测定方法。其基于碱性环境中二价铜离子被蛋白还原为一价铜离子,一价铜离子可与BCA形成蓝紫色络合物,该络合物在562 nm处具有较强的吸收值并与蛋白质浓度成正比,据此可测定蛋白质浓度。本试剂盒可兼容5%以内的SDSTriton X-100Tween等化学试剂,当样品中存在螯合剂EDTAEGTA、还原剂(二硫苏糖醇DTT,巯基乙醇)时,实验结果会受到影响。不适用BCA法时建议试用本公司生产的Bradford蛋白浓度测定试剂盒。

操作说明:(仅供参考)

1. 配制工作液:根据标准品和样品数量,按50体积BCA试剂加1体积Cu试剂(50:1)配制成BCA工作液,充分混匀(混合时可能会有浑浊,但混匀后就会消失)BCA工作液室温24小时内稳定。

2. 稀释标准品:取20 μL BSA标准品用PBS稀释至100 μL(样品一般可用PBS稀释),使终浓度为1 mg/mL。将标准品按02468121620 μL加到96孔板的蛋白标准品孔中,加PBS补足至20 μL

3. 将样品作适当稀释(最好多做几个梯度,如作2倍、4倍、8倍稀释),加20 μL96孔板的样品孔中。由于移液器在取小量样品时误差偏大,标准线前面的点可能不很准确,所以尽可能的让样品点落在标准线1/2后。

4. 各孔加入200 μL BCA工作液,37 ℃放置15-30 min。用酶标仪测定A562 nm,根据标准曲线计算出蛋白浓度。使用温箱孵育时,应注意防止因水分蒸发影响检测结果。

注意事项:

1. 长期不温条件下出现结晶沉淀时,可37 温育使其完全溶解,不影响使用。

2. 样品中若含有较多干扰物质时,请采用Bradford蛋白浓度测定试剂盒。

3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

4. 如果检测效果不佳,可以室温放置2 h60 放置30 min,络合物的颜色会随着时间的延长不断加深,显色反应也会随温度升高而加快;如果浓度较低,可以适当延长孵育时间或在较高温度下孵育。

5. 测定标准曲线时发现随着标准品浓度的增加吸光度或颜色没有明显变化,可能的原因是样品中含有严重干扰BCA法测定蛋白浓度的物质。

6. BCA法测定时颜色会随着时间的延长不断加深,建议每次测定时都作标准曲线,且显色反应的速度和温度有关,所以除非精确控制显色反应的时间和温度,否则每次都做标准曲线。

用户名: 匿名用户
日期: 2023-09-30
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