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羟自由基清除能力测定试剂盒(微量法) 02.13069-100

货号:02.13069-100品牌:EallBio基本售价:720.00元

 

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02.13069-100 Eallbio 100T 720.00元

 

羟自由基清除能力测定试剂盒(微量法

货号02.13069-100

规格:100 T

保存:2-8 ℃保存

产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系亿奥邦工作人员。

产品组成

100 T

提取液

60 mL

试剂一

22 mL

试剂二

200 μL

试剂三

11 mL

VC标准品(1 mg/mL)

1 mL

说明书

1

产品简介:

羟自由基作用于体内蛋白质、核酸、脂类等生物分子,造成细胞结构和功能受损,进而导致体内代谢紊乱引起疾病。羟自由基清除能力是样品抗氧化能力的重要指标之一,在抗氧化类保健品和药品研究中得到广泛应用。

H2O2/Fe2+通过Fenton反应产生羟自由基,水杨酸能有效捕捉产生的羟自由基并与其反应生成有色物质2,3-二羟基苯甲酸,在510 nm处有最大吸收峰,加入具有清除能力的物质后,有色物质便会减少,从而可以根据吸光值的数值判断样品清除羟自由基的能力。

注意:实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者 增加样本量进行检测。

自备实验用品:分析天平、紫外分光光度计、比色皿低温离心机和蒸馏水。

使用说明(仅供参考

一、样品的制备:

1. 组织:按照组织质量(g):蒸馏水体积(mL)15~10的比例(建议称取约0.1 g组织,加入1 mL蒸馏水)进行冰浴匀浆,然后10000 g4 ℃离心10 min,取上清,置冰上待测。

2. 血清、果汁等液体样品可直接测定。

3. 提取物(或者药物)可配制成一定浓度,如5 mg/mL

二、测定步骤:

1. 紫外分光光度计预热30 min,调节波长至510 nm

2. 将试剂二按1:800以水稀释,现用现配。

3. 4 mL EP管中加入如下试剂

A(对照管)

B(样品管)

C(对照参比管)

D(样品参比管)

100 μL蒸馏水

100 μL样品液

100 μL蒸馏水

100 μL样品液

100 μL试剂一

100 μL试剂一

100 μL试剂一

100 μL试剂一

200 μL试剂二

200 μL试剂二

200 μL试剂二

200 μL试剂二

反应10分钟

100 μL试剂三

100 μL试剂三

100 μL无水乙醇

100 μL无水乙醇

加试剂三后离心3 min,吸取上清液200 μL510 nm处测定吸光度。AC只需测定一次。若无510 nm波长也可选其附近。

三、计算公式:

清除率(%)=(A-C)-(B-D)/(A-C)×100%ABCD510 nm处各管吸光度值

注意事项:

为了比较不同样品羟自由基清除能力,对于同一批样品必须加入等量的样品,血清、组织匀浆、果汁等液体样品加入同样体积,提取物(或者药物)配制成同样浓度。

附录(仅供参考):

Vc浓度(mg/mL

0.015625

0.03125

0.0625

0.125

0.25

0.5

1

清除率(%)

5.27

6.8

13.94

18.51

27.13

45.89

97.6

                                
Vc浓度和OH自由基清除率关系图        实验实际照片

用户名: 匿名用户
日期: 2023-09-30
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