货号：02.11176-20/02.11176-50

产品简介：

脂质（Lipid）是中性脂肪、类脂及其衍生物的总称，是一种不溶于水而溶于有机溶剂的化合物。脂类是脂肪酸与醇脱水缩合生成的酯及其衍生物，动物体内主要包括脂肪（fats）、磷脂（phospholipids）和类固醇（steroids）等。人体的脂质主要有两种：一是储存脂质，如中性脂肪（即甘油三酯），主要分布于皮下、肾、胰腺等部位；二是结构脂质，如类脂（磷脂、糖脂、胆固醇等），主要分布于细胞内。脂滴是细胞内中性脂肪的主要贮存场所，在正常情况下，除脂肪细胞之外，其他细胞在光学显微镜下几乎看不到脂滴，如果细胞质内出现大量脂滴即指示为脂肪变性，常见于肝细胞、心肌细胞、肾曲管上皮细胞等。

油红O（Oil Red O, 简称ORO）是一种脂溶性偶氮染料，是很强的脂溶性试剂和脂肪染色剂，能特异性地使细胞或组织内甘油三脂等中性脂质等染色，而对磷脂和类固醇等染色较弱。当细胞或组织切片浸入油红O染色液时，借溶液作用使脂肪染色。染料在细胞内脂质的溶解度较原溶剂中的溶解度更大，所以在染色时染料就从有机溶剂转移入脂质而使脂肪染色，使其呈红色或橙红色。

产品规格：4×20ml/4×50ml

保存条件：

2-8oC避光保存，一年有效。

操作步骤：

1. 工作液的配制

    按照饱和油红O染色液：蒸馏水= 3：2的比例配成油红O工作液，混匀，室温放置5-10 min，过滤后使用。现用现配。

2. 细胞染色

(1) 移除细胞培养基，PBS洗两次，加固定液固定20-30 min。

(2) 弃去固定液，用蒸馏水洗2次。

(3) 60%异丙醇浸洗5 min。

(4) 弃去60%异丙醇后加入油红O染色工作液，覆盖住底板即可，浸染10-20 min。

(5) 弃去染色液，蒸馏水洗2-5次，洗去多余染液。

(6) Mayer苏木素染色液复染核1-2 min。弃去染液后水洗2-5次。

(7) 加入蒸馏水覆盖细胞并在显微镜下观察。

3. 冰冻切片染色

(1) 制作好的冰冻切片固定10 min，蒸馏水充分洗涤。

(2) 60%异丙醇浸洗20-30s 。

(3) 油红O染色工作液染色10-15 min。

(4) 60%异丙醇分化至间质清晰，蒸馏水中稍微清洗。

(5) Mayer苏木素染色液复染核1-5 min。

(6)（可选）自来水漂洗10 min或稀碳酸锂溶液中促蓝。

(7) 蒸馏水中清洗。

(8) 用滤纸吸干周围水分，甘油明胶封片并在显微镜下观察。

4. 细胞涂片染色

(1) 制备新鲜骨髓、血液涂片，林固定10-15 min。

(2) 取出涂片，放于流通的空气中10-15 min。

(3) 放入油红O染色工作液浸染15 min。

(4) 60%异丙醇分化20-30 s，流水冲洗，蒸馏水清洗。

(5) Mayer苏木素染色液复染核1-2 min。

(6) 蒸馏水清洗。

(7) 用滤纸吸干周围水分，甘油明胶封片并在显微镜下观察。

注意事项：

1. 油红O染色工作液不够稳定，易产生沉淀，不宜提前配制。

2. 样品固定时请使用4%多聚甲醛固定液或10%福尔马林，不可用醇类或丙酮等可以溶解脂肪的固定液。

3. 油红O染色时，应及时补充以避免染色液挥发，否则染色液可能会形成沉淀而产生背景。

4. 脂肪组织冰冻切片，冰冻温度比普通要低，切片厚度不可太薄，过薄的切片常会使脂质丢失。

5. 本试剂为油红O的饱和溶液，因此有少量沉淀为正常现象。使用时，应在配制成工作液后自行过滤。

6. 为了您的安全和健康，请穿戴实验服并戴一次性手套操作。

图1. 小鼠脂肪肝油红O染色（红色为脂肪颗粒）

A. 市售油红O染色试剂盒；B. 我公司油红O染色试剂盒

保存条件：2-8℃，6个月

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日期：	2023-04-02
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