货号：02.13112-1000T

规格：1000T

产品简介：

细胞膜绿色荧光染色试剂盒(DiO)，Cell Plasma Membrane Staining Kit with DiO (Green Fluorescence)是一种以DiO为荧光探针，能快速灵敏地对细胞膜进行绿色荧光染色标记的试剂盒。

DiO即DiOC18(3)，全称为3,3'-dioctadecyloxacarbocyanine perchlorate，分子式C₅₃H₈₅ClN₂O₆，分子量为881.72，是最常用的细胞膜荧光探针之一，呈现绿色荧光。DiO是一种亲脂性羰花青(carbocyanine)染料，具有很长的亲脂性烃链，进入细胞膜后可以侧向扩散逐渐使整个细胞的细胞膜被染色，染色后非常稳定。

DiO在进入细胞膜之前荧光非常弱，仅当进入到细胞膜后才可以被激发出很强的荧光。DiO被激发后可以发出绿色的荧光，最大激发波长为484nm，最大发射波长为501nm。

DiO被广泛用于正向或逆向的、活的或固定的神经等细胞或组织的示踪剂或长期示踪剂(long-term tracer)。DiO毒性很低，通常不会影响细胞的生存力。DiO对于细胞膜染色的荧光强度通常要低于DiI，有时对于某些经过固定的组织的染色效果欠佳。

本试剂盒除了最简单的细胞膜荧光标记外，还可以用于检测细胞的融合和粘附，检测发育或移植过程中细胞迁移，通过FRAP (Fluorescence Recovery After Photobleaching)检测脂在细胞膜上的扩散，检测细胞毒性和标记脂蛋白等。

本试剂盒可以直接染色活的细胞或组织，染色时间通常为5-20分钟。对于固定的细胞或组织，通常宜使用配制在PBS中的4%多聚甲醛进行固定，使用其它不适当的固定液会导致荧光背景较高。本试剂盒对HeCat细胞的染色效果参考图1。

图1. 细胞膜绿色荧光染色试剂盒(DiO)对HeCat细胞的染色效果。DiO的染色时间为15分钟。Hoechst33342的染色时间为10分钟。

DiO染色后可以兼容免疫荧光实验。建议使用免疫染色通透液或使用洋地黄皂苷配制的不会溶解细胞膜的通透液进行通透，其它去垢剂配制的通透液可能会溶解细胞膜上的脂类物质，造成DiO失去结合位置，最终导致DiO的染色失效。但通透也可能会影响DiO在细胞膜上的定位并会增加细胞内的染色，具体实验中需根据实验的需求选择合适的细胞通透液。

本试剂盒如果用于流式细胞仪，每个样品的检测体系体积为0.5ml时，可以进行200次检测；96孔板每孔检测体系的体积为100μl时可以进行1000次检测。

包装清单：

产品名称	包装
DiO (200X)	0.5ml
染色缓冲液	100ml
说明书	1份

保存条件：

-20℃避光保存，一年有效。染色缓冲液也可保存在4℃。

注意事项：

1. 荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。

2. 染色缓冲液经过过滤除菌处理，在使用时须注意避免微生物污染，否则很可能严重影响染色效果。如果染色缓冲液发生浑浊等明显的微生物污染，就不能继续使用。

3. 如果染色时间过长或染色后细胞继续培养，探针也可能进入细胞内而染色其它细胞器的膜。

4. 本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

5. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

保存条件：—20℃,12个月

用户名：	匿名用户
日期：	2023-04-02
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